今天，上海恒遠生物科技有限公司要與大家分享ELISA試劑盒技術(shù)的一些相關(guān)知識，希望能夠幫助到大家。

一、實驗原理：

結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標本（抗原或抗體）起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。根據(jù)實際的應(yīng)用方法，可以分成以下幾種：

• 雙抗夾心 ELISA：將捕獲抗體包被在固相載體上，封閉后加入待檢抗原，溫育后加入酶標檢測抗體，捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗，也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗，但是檢測抗體需要經(jīng)過酶標。

• 競爭ELISA：用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計好的體系，zui終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個抗原表位的蛋白檢測。

• 多因子ELISA檢測技術(shù)：多重ELISA芯片技術(shù)通過在96孔板的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體，隨后像ELISA一樣操作，通過化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。

受刺激的細胞產(chǎn)生的細胞因子是短暫的，并且不同細胞因子基因表達的動力學(xué)是變化的。通過ELISA實驗只能檢測到的免疫反應(yīng)性的細胞因子蛋白的含量，而這并不能*代表細胞因子的生物活性的水平。例如，使用抗細胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外，一種ELISA可以檢測部分降解的細胞因子蛋白，它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性（例如至少可識別兩個表位），當(dāng)時它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。

二、實驗過程：

包被酶標版>封閉 >加樣品孵育>洗滌 >加抗體孵育>洗滌 >加入酶底物>終止反應(yīng) >讀數(shù)

三、ELISA操作要點：

1. 選擇合適的固相載體；

2. 選擇合適的包被緩沖液；

3. 確定*包被量；

4. 加樣準確，避免產(chǎn)生氣泡。

    以上這些您都掌握了嗎？上海恒遠7月*正在火熱進行中，以下為我司*，咨詢。

    上海恒遠生物科技有限公司主營：elisa試劑盒銷售、elisa實驗外包、elisa技術(shù)指導(dǎo)、操作指導(dǎo)、elisa試劑盒代做實驗、代做課題等技術(shù)服務(wù)。經(jīng)過多年的磨練以及在實踐中的認識，我們形成了*的市場優(yōu)勢：產(chǎn)品齊全、價格合理、經(jīng)營穩(wěn)健、信息反饋及時、保證售前，售中，售后始終如一的提供zui用心的服務(wù)，新老客戶均可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)。